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組織勻漿機(jī)對(duì)樣品勻漿會(huì)破壞細(xì)胞嗎?
組織勻漿機(jī)對(duì)樣品勻漿會(huì)破壞細(xì)胞嗎?組織勻漿的時(shí)候就會(huì)讓細(xì)胞裂解,因?yàn)榻M織勻漿就是通過(guò)物理研磨的方式讓組織均勻。在擠壓研磨的過(guò)程中,細(xì)胞壁和細(xì)胞膜也會(huì)因?yàn)槲锢碜饔枚l(fā)生破碎,從而細(xì)胞被裂解開(kāi)。
組織勻漿后的高轉(zhuǎn)速離心過(guò)程是不會(huì)讓細(xì)胞裂解開(kāi)的,因?yàn)殡x心力并不能破碎掉細(xì)胞壁和細(xì)胞膜。但是在組織勻漿的過(guò)程中,已經(jīng)會(huì)讓細(xì)胞裂解了。
高壓勻漿機(jī)細(xì)胞破碎影響因素有:勻漿操作壓力對(duì)細(xì)胞破碎過(guò)程的影響、勻漿次數(shù)對(duì)細(xì)胞破碎過(guò)程的影響、菌體濃度對(duì)細(xì)胞破碎過(guò)程的影響、懸浮體系對(duì)細(xì)胞破碎過(guò)程的影響。
影響高壓勻漿破碎的因素主要有壓力、溫度和通過(guò)勻漿器閥的次數(shù),由分析可知,操作壓力對(duì)細(xì)胞破碎的影響要比勻漿次數(shù)的影響大得多。從提高破碎效率的角度應(yīng)選擇盡可能高的壓力;而從降低能耗及延長(zhǎng)設(shè)備壽命的角度應(yīng)避免很高的壓力,因此,工業(yè)生產(chǎn)中常采用的壓力為55-70Mpa。
高壓勻漿法操作參數(shù)少,且易于確定;且樣品損失量少,在間歇處理少量樣品方面效果好,在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)中都已得到應(yīng)用,適用于酵母和大多數(shù)細(xì)胞的破碎。對(duì)于易造成堵塞的團(tuán)狀或絲狀**以及一些易損傷勻漿閥,質(zhì)地堅(jiān)硬的亞細(xì)胞器一般不適用。
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